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荧光滤光片

什么是荧光滤光片?

荧光滤光片是应用于生物医学和生命科学仪器的关键元件,主要作用是在荧光显微光学系统中筛选激发光与发射光的特征波段光谱

 

荧光滤光片的真面目

滤光片具体在什么位置呢,这个四四方方的黑色小模块就是今天的主角,它就放在显微镜的荧光转盘里,称为荧光滤镜组(fluorescence filter cube)。

 

▪ 荧光滤镜组主要由激发滤光片分色镜和发射滤色片组成。

举例:▉ 440-490激发光; ▉ 500进行分光; ▉ 收集500-550的信号

 


✓ 激发滤色片(EX):只能让特定波段的激发光通过

✓ 发射滤色片(EM):进一步过滤掉未被分色镜滤掉的激发光和其它杂散光

✓ 分色镜(BS):将激发光反射后照射到样品上,它只允许样品发射的荧光透过,经发射滤色片进入目镜或者CCD

 


荧光滤片的常见分类

简单来说滤光片通常有三种方式筛选波段,分别是BP、LP、SP。同时根据实际应用又可分为单通和多通滤光片。

 

 带通滤光片BP(band-pass filter)

允许某个范围内波段的荧光通过,比如下图中红线所示BP 420-450nm ,表示只能420-450nm的荧光通过,这种类型的滤光片被称为带通滤光片。是最为常见的。

 

 长通滤光片LP(Long-pass filter)

允许长于某个波段的荧光通过,比如下图中红线所示LP 510 nm ,表示长于510nm的荧光通过,这种类型的滤光片被称为长通滤光片。

 

短通滤光片SP(Short-pass filter)

允许短于某个波段的荧光通过,比如下图中蓝线所示SP 1064nm,表示短于1064nm的光通过, 这种类型的滤光片被称为短通滤光片。短通滤光片在普通的荧光显微镜中并不常见。

 

单通荧光片(Single Band Filter)

比如典型的单通荧光滤镜组FITC,激发滤色片和发射滤色片都只有一个带通(长通或短通),通常只激发和筛选FITC及相近染料的荧光,在实际应用中,单通滤片是最常用到的。

多通荧光片( Multi Band Filter )

是指激发滤色片和发射滤色片都具有多个带通(长通或短通),比如下图所示,可以同时激发DAPI、FITC和Texas Red。

在实际应用中,多通滤片比较适合直接用眼睛观察,如果用于成像很大机率会出现串色现象。

 


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